MISE A JOUR : 17 FEVRIER 2021

Préambule : les informations, valeurs, tableaux, graphes et questions présentées ci-dessous ne sont qu'une partie du sujet étudiée.
Certaines questions ne figurent pas dans le document support de l'activité mais ont été posées au cours des séances.

Limiter/éliminer les micro-organismes indésirables

Cette activité fait suite à celle mettant en évidence l'omniprésence des micro-organismes et la facilité de transmission manuportée.
Schéma de la procuédure opératoire :

Résultats des manipulations :

Paillasse non décontaminée :

Paillasse traitée avec un chiffon papier imprégné d'eau distillée (action mécanique uniquement) :

Paillasse traitée avec un chiffon papier imprégné d'eau de Javel, en pissette (action mécanique + chimique) :

Paillasse traitée avec un chiffon papier imprégné de spray détergent/désinfectant (action mécanique + chimique) :

Procéder à la description de l'aspect macroscopique d'une colonie.

Procéder au dénombrement des colonies sur chaque boite (donc après chaque traitement).

Rapporter la valeur du dénombrement à 10 cm².

Comparer les résultats obtenus en rédigeant une forme adaptée. (prendre en photo et partager via l’application Pearltrees – cf. Fiche Outils)

En déduire l'efficacité de chaque produit testé et d

Proposer des mesures à mettre à oeuvre avant et après manipulation concernant l'entretien de la paillasse.

Effectuer un transfert stérile de bouillon nutritif

Transfert aseptique d’un milieu de culture

• Annoter quatre tubes à hémolyse stériles de 1 à 4, en indiquant le numéro de poste.
• Transférer 1 mL de bouillon nutritif ordinaire stérile BNO dans chaque tube à hémolyse stérile, à l’aide d’une unique pipette graduée stérile de 1 mL (répéter l’opération 4 fois).
• Incuber 3 tubes à hémolyse, contenant le bouillon nutritif, pendant 24 h à 37 °C (regrouper tous les tubes sur 2 longs portoirs)
• Réserver le 4ème tube pour la technique suivante.

Remarques : l’utilisation d’un bec (électrique ou à flamme) n’est pas une nécessité : un strict respect des Bonnes Pratiques de Laboratoire et du matériel à usage unique permettent de ne pas utiliser de système chauffant. C’est le cas actuellement dans la plupart des laboratoires d’analyses de biologie médicale.

Schéma de la procuédure opératoire :

Exemple de résultat (à venir)

Décrire l'aspect de chacun des bouillons nutritifs avant et après l’incubation.

En déduire si les trois transferts ont été réalisés en asepsie.

3^ème partie : réaliser une suspension bactérienne à partir d'une culture en milieu solide puis réaliser un isolement sur miliéu gélosé

?    Se procurer une culture pure de 18 h sur gélose nutritive ordinaire GNO de la bactérie Escherichia coli (classe 1), présenté soit sur une gélose inclinée en tube, soit sur une gélose en petite boite de Pétri.
?    Réaliser une suspension de cette bactérie dans le 4ème tube à hémolyse contenant du bouillon nutritif ordinaire stérile, en prélevant, en condition aseptique, un peu de culture pure et en la dissociant d ans le bouillon (voir démonstration).
?    A partir de cette suspension, réaliser un isolement sur gélose Trypticase-Soja (GTS ou TSA en anglais pour Trypticase Soy Agar) en reproduisant la démonstration.
 

Exemple d'isolement obtenu :

Rédiger un schéma de la procuédure opératoire.

Décrire l'aspect des colonies ayant cultivé sur la gélose nutritive en utilisant la FT « Description des colonies bactériennes ».

Déduire, d'après l'aspect desz colonies sur l'isolement, si les étapes : transfert du bouillon nutritif stérile / réalisation de la suspension / isolementont été réalisées en conditions aseptiques.

Ce qui suit peut provoquer un malaise chez les personnes sensibles :

CECI N'EST PAS UN ISOLEMENT !!!!