Objectif : mettre en évidence la présence (ou l'absence) d'un antigène (bactérien ou viral) par une technique rapide d'identification combinant chromatographie et immunologie : l'imunochromatograpie
- Comprendre le principe de l’immunochromatographie.
- Vérifier si un kit est toujours fonctionnel après sa date de péremption.

L'immunochromatographie associe :
-une méthode de séparatation  :la chromatographie ;
-une méthode immunologique ; formation d'un complexe immun entre antigène et anticorps.

Ces phénomènes se déroulent sur un support (membrane de cellulose par exemple) sensibilisé par des anticorps :
- migration de réactifs par capillarité
- formation d’immuncomplexes
- immobilisation des immuncomplexes sur le support.

• À l’aide du document 1, présenter l'intérêt du test.

• À l’aide du document 2 ci-dessous, résumer le principe du test.

• A l’aide du document 3ci-dessous , indiquer quel contrôle correspond à un témoin de spécificité et quel contrôle correspond à un témoin d’efficacité.

• Indiquer l’intérêt de réaliser ces tests et à quel moment utiliser ces contrôles.

• Schématiser à l'aide du document 4 ci-dessous les molécules présentes sur la bandelette test :
  - avant utilisation
  - après le dépôt d’une solution de contrôle positif
  - après le dépôt d’une solution de contrôle négatif.

Mise en oeuvre
-Préparer les solutions de contrôle positif et contrôle négatif et les tester selon la procédure décrite dans la document 5 ci-dessous.

• Représenter les résultats obtenus sous forme de schéma légendé.

• Conclure en lien avec l’objectif visé.

Document 1 : summary and explanation of the test
Influenza is a highly contagious, acute, viral infection of the respiratory tract. It is a communicable disease easily transmitted through the coughing and sneezing of aerosolized droplets containing live virus. Influenza outbreaks occur each year during the fall and winter months. Type A viruses are typically more prevalent than type B viruses and are associated with most serious influenza epidemics, while type B infections are usually more mild.
Rapid diagnosis of influenza A and B can lead to reduced hospital stays, antimicrobial use and cost of hospital care. The BinaxNOW® Influenza A & B Test provides a simple, rapid method for the diagnosis of influenza A and B using swab and nasal wash/aspirate specimens.

Document 2 : principle of the test
The BinaxNOW® Influenza A & B Test is an immunochromatographic membrane assay that uses highly sensitive monoclonal antibodies to detect influenza type A and B nucleoprotein antigens in specimens.
These monoclonal antibodies and a control antibody are immobilized onto a membrane support as three distinct lines and combined with other reagents to construct a test strip.µ
Swab specimens are eluted or washed off the swab into an elution solution, whereas nasal wash/aspirate samples require no preparation.
Sample is added to the top of the test strip and the test device is closed. Test results are interpreted at 15 minutes based on the presence or absence of pink-topurple colored Sample Lines. The blue Control Line turns pink in a valid assay

Document 3 : reagents and materials
Test Devices: a cardboard test device containing the test strip.

• Transfer Pipettes: fixed volume (100 µL), transfer pipettes used to transfer sample to the test device.
• Positive Control Swab: inactivated influenza A and B dried onto swab.
• Negative Control Swab: inactivated Streptococcus Group A dried onto swab.
• Elution Solution Vials for Control Swabs/Swab Specimens: Vials containing a fixed volume (0.5 mL) of elution solution used to prepare the Control Swabs/Swab Specimens for testing.
• NP Swabs: Sterile, swabs for use in the BinaxNOW® Influenza A & B Test

Positive and Negative Controls

Good laboratory practice suggests the use of positive and negative controls to guarantee that:
- test reagents are working; and
- the test is correctly performed.
BinaxNOW® Test Kits contain Positive and Negative Control Swabs. These swabs will verify the entire assay. Test these swabs once with each new kit.

Document 4 : sample preparation and test procedure

Voici le résultat obtenu avec un test immmunochromatographie de détection d'antigènes du virus Influenza (virus grippal)

• à gauche une bandelette testées avec la solution de contrôle négatif (Streptocoque du groupe A inactivé)
• à droite une seconde bandelette du même lot testée avec la solution de contrôle positif (virus influenza de type A et de type B inactivés)

Et la vidéo expliquant le principe :