Objectif : effectuer le dosage du cholesérol plasmatique dans le cadre d'un diagnostic de santé

Le cholestérol plasmatique est dosé à l'aide d'un kit fabriqué par Biomérieux (kit "Cholestérol RTU) après réalisation d'une gamme d'étalonnage de concentration croissante en cholestérol.

• Indiquer, en justifiant, quelle est : la réaction principale ; la réaction indicatrice ; la réaction intermédiaire (si il y en a une)

La méthode mise en oeuvre est une méthode en point final : on attend la fin de la réaction ( au bout de 15 minutes : tout le substrat consommé).
Le substrat doit donc être en concentration limitante, tous les autres constituants (enzymes, coenzymes, cofacteurs) devant être en large excès avec des conditions physico-chimiques (température, pH) constants et proches des optimaux

Etalonnage de la prodécure : dosage du cholestérol plasmatique par méthode enzymatique en point final

L'échantillon à analyser est testé en double essai ; la détermination de la concentration en cholestérol dans le plasma peut être déterminée :

• soit par report graphique (la pire des méthodes... la faible résolution des échelles provoque une inexactitude énorme sur la valeur)
• soit par le calcul en utilisant les paramètres de la droite (pente, ici en L·g-¹, et ordonnée à l'origine)

Données :
- le plasma testé a été dilué au 1/20
- les valeurs d'absorbance mesurées pour les deux essais sont respectivement : 0,199 et 0,202
- l'écart-type de répétabilité de la procédure de dosage : s_r = 0,06 g·L^-1
- l'incertitude-type composée sur cette procédure de dosage : uc = 0,09 g·L^-1

• Démontrer que ρ_{(cholestérol ; plasma)} en g.·^-1 est égale à 2,203 g·L^-1 pour l'essai 1 et 2,236 g·L^-1 pour l'essai 2.

• Montrer que les deux valeurs mesurées obtenues sont bien compatibles (cf. l'aide mémoire de métrologie).

• En déduire la valeur retenue pour ρ_{(cholestérol ; plasma)}.

• Calculer et exprimer l'incertitude élargie U en choisissant une valeur du facteur d'élargissement k permettant d'obtenir un niveau de confiance de 95 %.
  L’incertitude élargie est arrondie de la façon suivante  :  
  -  si le premier chiffre significatif est 1, 2 ou 3 : garder deux chiffres significatifs ;
  -  si le premier chiffre significatif est 4 ou plus : garder un chiffre significatif.
  ==> l'incertitude élargie U vaut-elle 0,18 g·L^-1 ou 0,2 g·L^-1 ?

• Exprimer le résultat de mesure, associant la valeur retenue de ρ_{(cholestérol ; plasma)} et l'incertitude élargie, en respectant la règle suivante : la  valeur  retenue  du  résultat  est  arrondie  de  la  façon  suivante :  le  dernier  chiffre  significatif  doit  être  à  la  même position décimale que le dernier chiffre de l’incertitude élargie.

• Conclure en utilisant les données suivantes :