Techniques spectrophométriques

Le spectrophotométre est l'un des instruments privilégié dans nos activités de biotechnologie. Ses champs d'applications sont variés : dosages moléculaire, cinétique enzymatique, estimation de populations bactériennes et suivi de croissance...
Ainsi, il est essentiel de connaître aussi bien son principe de fonctionnement que ses caractéristiques et limites d'utilisation.

  • 1/ La source lumineuse (ampoule) du spectrophotomètre :

  • 2/ A l'intérieur d'un spectrophotomètre "UV/Visible", on trouve :

  • 3/ Le domaine des ondes électromagnétiques visibles pour l'oeil humain s'étend de :

  • 4/ Le monochromateur :

  • 5/ Le choix d'une cuve de mesure :

  • Une substance naturellement colorée :

    6/ Une substance naturellement colorée :

  • 7/ Dans un spectrophotomètre, on appelle "Io" l'intensité :

  • 8/ L'absorbance est mesurée en calculant : A = log (Io / It). Que signifie alors "A = 0" :

  • On souhaite doser la concentration de la chlorophylle b au sein d'un mélange de pigments. On choisit de mesurer à :

    9/ On souhaite doser la concentration de la chlorophylle b au sein d'un mélange de pigments. On choisit de mesurer à :

  • On souhaite maintenant doser la phycocyanine au sein du même mélange. La longueur d''onde à choisir est :

    10/ On souhaite maintenant doser la phycocyanine au sein du même mélange. La longueur d''onde à choisir est :