Limiter les micro-organismes indésirables

Préambule : les informations, valeurs, tableaux, graphes et questions présentées ci-dessous ne sont qu'une partie du sujet étudiée.
Certaines questions ne figurent pas dans le document support de l'activité mais ont été posées au cours des séances.

 

1ère partie : limiter/éliminer les micro-organismes indésirables

Cette activité fait suite à celle mettant en évidence l'omniprésence des micro-organismes et la facilité de transmission manuportée

Schéma de la procuédure opératoire :

Limiter les o effet desinfectant

 

Résultats des manipulations :

Paillasse non décontaminée :

Img 20161122 125407

 

Paillasse traitée avec un chiffon papier imprégné d'eau distillée (action mécanique uniquement)

Img 20161122 125413

 

 

Paillasse traitée avec un chiffon papier imprégné d'eau de Javel, en pissette (action mécanique + chimique) :

Img 20161122 125417

 

Paillasse traitée avec un chiffon papier imprégné de spray détergent/désinfectant (action mécanique + chimique) :

Img 20161122 125422

Comparaison desinfectants labo annote

1. Procéder à la description de l'aspect macroscopique d'une colonie.

2. Procéder au dénombrement des colonies sur chaque boite (donc après chaque traitement).

3. Ramener la valeur du dénombrement à 10 cm².

4. Comparer les résultats obtenus en rédigeant une forme adaptée. (prendre en photo et partager via l’application Pearltrees – cf. Fiche Outils)

5. En déduire l'efficacité de chaque produit testé et d

6. Proposer des mesures à mettre à oeuvre avant et après manipulation concernant l'entretien de la paillasse.

 

 

2ème partie : effectuer un transfert stérile de bouillon nutritif

Transfert aseptique d’un milieu de culture

  • Annoter quatre tubes à hémolyse stériles de 1 à 4, en indiquant le numéro de poste.
  • Transférer 1 mL de bouillon nutritif ordinaire stérile BNO dans chaque tube à hémolyse stérile, à l’aide d’une unique pipette graduée stérile de 1 mL (répéter l’opération 4 fois).
  • Incuber 3 tubes à hémolyse, contenant le bouillon nutritif, pendant 24 h à 37 °C (regrouper tous les tubes sur 2 longs portoirs)
  • Réserver le 4ème tube pour la technique suivante.

Remarques : l’utilisation d’un bec (électrique ou à flamme) n’est pas une nécessité : un strict respect des Bonnes Pratiques de Laboratoire et du matériel à usage unique permettent de ne pas utiliser de système chauffant. C’est le cas actuellement dans la plupart des laboratoires d’analyses de biologie médicale.

Schéma de la procuédure opératoire :

Limiter les o transfert sterile

Exemple de résultat (à venir)

1. Décrire l'aspect de chacun des bouillons nutritifs avant et après l’incubation.

2. En déduire si les trois transferts ont été réalisés en asepsie.

 

3ème partie : réaliser une suspension bactérienne à partir d'une culture en milieu solide puis réaliser un isolement sur miliéu gélosé

□    Se procurer une culture pure de 18 h sur gélose nutritive ordinaire GNO de la bactérie Escherichia coli (classe 1), présenté soit sur une gélose inclinée en tube, soit sur une gélose en petite boite de Pétri.
□    Réaliser une suspension de cette bactérie dans le 4ème tube à hémolyse contenant du bouillon nutritif ordinaire stérile, en prélevant, en condition aseptique, un peu de culture pure et en la dissociant d ans le bouillon (voir démonstration).
□    A partir de cette suspension, réaliser un isolement sur gélose Trypticase-Soja (GTS ou TSA en anglais pour Trypticase Soy Agar) en reproduisant la démonstration.
 

Exemple d'isolement obtenu :

Isolement sur gts

1. Rédige un schéma de la procuédure opératoire.

2. Décrire l'aspect des colonies ayant cultivé sur la gélose nutritive en utilisant la FT « Description des colonies bactériennes ».

3. Déduire, d'après l'aspect desz colonies sur l'isolement, si les étapes : transfert du bouillon nutritif stérile / réalisation de la suspension / isolementont été réalisées en conditions aseptiques.

 

Screenshot 20180908 120556

Ce qui suit peut provoquer un malaise chez les personnes sensibles :

Boucherie sur gelose

CECI N'EST PAS UN ISOLEMENT !!!!

Ajouter un commentaire

Date de dernière mise à jour : 19/09/2018